Reconstitution
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La reconstitution est le processus de redissolution d’un peptide lyophilisé en solution à la paillasse, prêt à l’emploi dans une expérience. Bien réalisée, elle préserve la pureté, l’identité et l’activité biologique du peptide ; réalisée avec négligence, elle peut introduire une contamination, une dégradation partielle ou des concentrations incohérentes d’une réplique expérimentale à l’autre. Le choix du solvant dépend du peptide et de l’application en aval. L’eau stérile (qualité USP) est le choix le plus simple pour une reconstitution de courte durée et donne une solution propre et non tamponnée. L’eau bactériostatique (contenant 0,9% d’alcool benzylique) inhibe la croissance microbienne et convient aux flacons à usages multiples pendant 1-28 jours à 2-8°C, selon la stabilité intrinsèque du peptide. Des tampons spécifiques - PBS à pH 7,4, acétate à pH 4-5, bicarbonate d’ammonium pour une MS en aval - sont choisis lorsque le pI du peptide, sa solubilité ou le contexte expérimental l’exigent. Certains peptides hydrophobes nécessitent une dissolution initiale dans un petit volume de DMSO ou d’acide acétique avant dilution dans le tampon de travail. Le volume à ajouter est calculé pour obtenir la concentration finale souhaitée : diviser la masse indiquée sur le flacon par le volume donne la concentration. La plupart des laboratoires aliquotent immédiatement la solution reconstituée en volumes à usage unique, conservent les aliquotes à -20°C ou -80°C et décongèlent une aliquote par expérience pour éviter la dégradation du stock par congélation-décongélation. Documentez les conditions de reconstitution dans le cahier de laboratoire : solvant, volume, date, concentration attendue et toute observation visuelle (turbidité, précipité, couleur). Cette documentation est essentielle pour la reproductibilité et est souvent demandée par les relecteurs lors du compte rendu de recherches fondées sur des peptides.
Voir aussi
- Lyophilisé (séché par congélation)
- Conservation des peptides
Dernière mise à jour : 4 mai 2026